В качестве микроорганизма используемого для синтеза инсулина используют E. Coli, в которой воссоздают последовательность ДНК по аминокислотной последовательности инсулина, раздельно синтезируя искусственные гены его А- и В- цепей. На 5- конце каждого из них располагается кодон метионина (который в синтезированном конце является N-концевым), а на 3- конце – терминирующие последовательности. Каждый из генов встраивается в ген В-галактозидазы плазмид, а их в свою очередь вводят в клетки E. Coli. Поскольку бактерии растят на среде с галактозой, а не с глюкозой, то в них индуцируется синтез В-галактозидазы, а вместе с ней – А- и В- цепей инсулина, присоединенных через остаток метионина.
После лизиса бактерий и обработки бромцианом. который специфически расщепляет белки по остатку метионина, цепи инсулина отделяют от В-галактозидазы. Затем проводят очистку цепей и их объединение, в результате чего образуется нативный двухцепочечный инсулин.
Иногда получают неактивный проинсулин, а затем с использованием трипсина проводят высщепление С-пептида с образование активного инсулина.
+Ферментативные среды должны содержать галактозу потому что она более интенсивному синтезу В-галактозидазы, а в месте с ней А- и В- цепей инсулина. Лактоза добавляется в среды как дополнительный источник энергии для бактерии. Она постепенно усваивается микроорганизмом, не вызывая катаболитную репрессию, как глюкоза. Так высвобождающаяся при гидролизе лактозы глюкоза репрессирует бетагалактозидазу, в результате чего гидролиз лактозы (и появление в среде глюкозы) замедляется. В результате количество инсулина (вторичного метаболита) увеличивается.
Лестница Жизни – образ, отражающий идею движения, раскрытия Жизни во времени и пространстве. Согласно древним знаниям, на первой ступени находятся минералы. Да, да, минералы. Они тоже живые, но жизнь в них проявляется очень слабо и не соответствует всем существующим в науке критериям. Но минералы откликаются на воздействия извне расширением и сжатием, структурными трансформациями (графит-алмаз), преобразованием энергии (лазерная генерация и пьезоэлектрический эффект). Минералы питаются и растут (вырастить кристаллы можно и в домашних условиях), «стареют» (бирюза и опал) и «болеют» («оловянная чума»), «помнят» оказанное на них воздействие (кристаллы бромистого серебра в фотографии и сплав нитинол).
Пьезоэлектрический эффект – возникновение электрического напряжения между поверхностями кристалла при его деформации (кристаллы кварца и турмалина).
Минерал скородит (от греч. «скородион» чеснок) – (арсенат железа) при ударах издает характерный чесночный запах.
Оловянная чума – превращение так называемого белого олова (пластичный металл) в серое (с меньшей плотностью атомов в кристаллической решетке), при котором металл рассыпается в порошок. Наибольшую скорость распространения имеет при температуре 33 °C.
В качестве микроорганизма используемого для синтеза инсулина используют E. Coli, в которой воссоздают последовательность ДНК по аминокислотной последовательности инсулина, раздельно синтезируя искусственные гены его А- и В- цепей. На 5- конце каждого из них располагается кодон метионина (который в синтезированном конце является N-концевым), а на 3- конце – терминирующие последовательности. Каждый из генов встраивается в ген В-галактозидазы плазмид, а их в свою очередь вводят в клетки E. Coli. Поскольку бактерии растят на среде с галактозой, а не с глюкозой, то в них индуцируется синтез В-галактозидазы, а вместе с ней – А- и В- цепей инсулина, присоединенных через остаток метионина.
После лизиса бактерий и обработки бромцианом. который специфически расщепляет белки по остатку метионина, цепи инсулина отделяют от В-галактозидазы. Затем проводят очистку цепей и их объединение, в результате чего образуется нативный двухцепочечный инсулин.
Иногда получают неактивный проинсулин, а затем с использованием трипсина проводят высщепление С-пептида с образование активного инсулина.
+Ферментативные среды должны содержать галактозу потому что она более интенсивному синтезу В-галактозидазы, а в месте с ней А- и В- цепей инсулина. Лактоза добавляется в среды как дополнительный источник энергии для бактерии. Она постепенно усваивается микроорганизмом, не вызывая катаболитную репрессию, как глюкоза. Так высвобождающаяся при гидролизе лактозы глюкоза репрессирует бетагалактозидазу, в результате чего гидролиз лактозы (и появление в среде глюкозы) замедляется. В результате количество инсулина (вторичного метаболита) увеличивается.
Объяснение:
Объяснение:
Лестница Жизни – образ, отражающий идею движения, раскрытия Жизни во времени и пространстве. Согласно древним знаниям, на первой ступени находятся минералы. Да, да, минералы. Они тоже живые, но жизнь в них проявляется очень слабо и не соответствует всем существующим в науке критериям. Но минералы откликаются на воздействия извне расширением и сжатием, структурными трансформациями (графит-алмаз), преобразованием энергии (лазерная генерация и пьезоэлектрический эффект). Минералы питаются и растут (вырастить кристаллы можно и в домашних условиях), «стареют» (бирюза и опал) и «болеют» («оловянная чума»), «помнят» оказанное на них воздействие (кристаллы бромистого серебра в фотографии и сплав нитинол).
Пьезоэлектрический эффект – возникновение электрического напряжения между поверхностями кристалла при его деформации (кристаллы кварца и турмалина).
Минерал скородит (от греч. «скородион» чеснок) – (арсенат железа) при ударах издает характерный чесночный запах.
Оловянная чума – превращение так называемого белого олова (пластичный металл) в серое (с меньшей плотностью атомов в кристаллической решетке), при котором металл рассыпается в порошок. Наибольшую скорость распространения имеет при температуре 33 °C.